avidity BirA生物素蛋白連接酶說明書

BirA500-BirA500：BirA生物素-蛋白質(zhì)連接酶標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)試劑盒，250.00美元

BirA生物素蛋白連接酶（EC 6.3.4.15）激活生物素形成5'-腺苷酸生物素，并將生物素轉(zhuǎn)移至生物素受體蛋白（例如AviTag™肽）。它還起著生物素操縱子阻遏物的作用。該蛋白質(zhì)由birA基因編碼。

請注意：我們強烈建議使用AviTag™氨基酸序列，而不是其他生物素化肽序列。BirA酶以2倍于天然底物（BCCP）的反應(yīng)速率對AviTag™序列進行生物素化處理，并且比使用中的其他肽序列高出一個數(shù)量級或更多。與其他Biotinylation-of-Peptide序列相比，AviTag™需要較少的酶量和較短的孵育時間，從而大程度地減少了與蛋白酶和蛋白質(zhì)不穩(wěn)定性相關(guān)的輔助問題。

產(chǎn)品信息

套件隨附以下內(nèi)容：

• 兩（2）個小瓶，每瓶20uL 1mg / mL BirA生物素蛋白連接酶（總共40ug）
• 兩（2）個每瓶1.5mL的BiomixA（0.5M Bicine緩沖溶液，pH 8.3）
• 兩（2）個每瓶1.5mL的BiomixB（100mM ATP，100mM Mg（OAc）2、500uM d-生物素）
• 兩（2）個每小瓶1.5mL的BIO-200（500uM d-生物素）

BirA生物素蛋白連接酶（EC 6.3.4.15）通過ATP中間體（生物素5'-腺苷酸）以高效，針對性的方式將d-生物素共價添加到生物素受體肽/蛋白質(zhì)上。酶促生物素化蛋白的下游應(yīng)用是多種，重要和強大的。通常利用*的生物素-親和素/鏈霉親和素相互作用來進行親和層析或?qū)⒌鞍踪|(zhì)固定在表面或底物上。通過抗生物素抗體或抗生物素蛋白/鏈霉親和素-報告酶偶聯(lián)物（-HRP，-堿性磷酸酶）或熒光探針進行蛋白質(zhì)檢測成為可能。生物素化的MHC分子的多聚體形式是免疫生物學(xué)中流行的工具。

當(dāng)與我們的AviTag™生物素受體肽氨基酸序列結(jié)合使用時，生物素化作用是天然大腸桿菌BCCP底物的兩倍，并且比其他肽序列生??物素化作用高一個數(shù)量級或更多。因此，與其他可用序列相比，AviTag™序列需要更少的BirA酶和較短的孵育時間即可完成生物素化反應(yīng)。如果需要考慮蛋白質(zhì)的不穩(wěn)定性或蛋白酶活性，這對于下游的成功可能很重要。

我們的BirA酶是野生型大腸桿菌，由birA基因編碼，并通過傳統(tǒng)方法純化至純度超過99％。該酶的其他名稱包括：生物素連接酶；生物素操縱子阻遏蛋白 birA; 生物素全酶合成酶；生物素-[乙酰-CoA羧化酶]合成酶；生物素-[乙酰-CoA-羧化酶]連接酶；生物素-[乙酰-CoA羧化酶]合成酶；乙酰輔酶A全羧化酶合成酶；乙酰輔酶A全羧化酶合成酶；生物素：脫羧羧化酶連接酶；生物素全酶合成酶；HCS。